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DNase I (RNase Free)

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ZL183657-1KU 1KU/瓶 1KU RDLand
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产品内容:                 

产品简介:

DNasel是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链DNA其原理为DNase I水解磷酸二键产生带有5´-磷酸基团和3´-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+Mn2+都可以激活DNasel的活性,而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂,使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。

实验前准备及重要注意事项

1.因为DNasel经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验,所以在酶制备过程中最大限度的避免了RNase污染,可以安全地用于RNA的提取,但由于该酶中不含RNase 抑制剂,提醒使用时注意防止外源RNase的污染。

2.DNasel受剪切力的影响比较大,使用前可以将离心管上下颠倒混匀,避免涡旋震荡。

3.每处理1 ug RNADNaseI用量不要超过1U

使用说明:

1. 以制备用于RT-PCRRNA样品为例,配置10ul反应体系,如下表:

2.37℃孵育30分钟。

3.加入1 ul200 mM EDTA65℃孵育10分钟,使DNase I失活,终止反应。

4.处理后的RNA可用于RT-PCR4

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